影響網織紅細胞計數標準性的因素為染液的質量、計數紅細胞的個數、染色溫度和時間、網織紅細胞的辨認水平。網織紅細胞計數：
（一）原理網織紅細胞是晚幼紅細胞脫核后但尚未完全成熟的紅細胞，胞質中尚有核糖體、核糖核酸等嗜堿性物質殘存，經煌焦油藍或新亞甲藍活體染色后，胞質中可見藍或藍綠色枝點狀甚至網織狀結構。
（二）方法活體染色法．近年來還可通過某些血液自動分析儀及流式細胞術檢測法進行網織紅細胞計數。
（三）參考值（活體染色法）
成人和兒童：0.005-0.015
新生兒：0.02-0.06
網織紅細胞絕對值：（24-84)×10^9/L
（四）臨床意義
網織紅細胞計數反應骨髓造血功能的重要指標。
網織紅細胞增多表示骨髓紅系增生旺盛，常見于溶貧、急性失血、缺鐵貧、巨幼貧等，網織紅細胞減少表示骨髓造血功能減低，常見于再障、骨髓病性貧血。
網織紅細胞是介于晚幼紅細胞和成熟紅細胞之間尚未完全成熟的紅細胞，經煌焦油藍染液進行活體染色后胞漿中可見有藍綠色的網狀結構，故名網織紅細胞，Heilmyer氏根據其發育階段把它分為五型：
0型：是有核的網織紅細胞，胞漿內含有網織物者此型僅見于正常骨髓中。
I型：紅細胞幾乎被網織物充滿，此型亦僅見于正常骨髓中。
II型：位于紅細胞中央線團樣結構，開始松散、此型大量存在于骨髓中。
Ⅲ型：網織結構稀小，呈不規律枝點狀排列，末梢血中可見少量。
IV型：胞漿中嗜堿物質很少呈單獨的細顆粒粒可短絲狀，正常血液中的網織細胞大多見于此型。
為了充分利用從網織紅細胞發育過程中獲得的有關紅細胞生成活性的全部信息，除計數網織紅細胞外，確定網織紅細胞的成熟分型是十分必要的，從外周血中正常情況下能檢測到Ⅲ型網織紅細胞約0.2～0.3，IV型約0.7～0.8，但在激活的紅細胞生成中還能檢測到I型和II型網織紅細胞并且Ⅲ型網織紅細胞明顯增多，這將對紅細胞生成研究提供良好信息，對臨床診斷提供有力幫助。
網織紅細胞增多：表示骨髓紅細胞生成旺盛，常見于溶血性貧血，特別是急性溶血（高達0.6～0.8）。急性失血后5～10天網織紅細胞達高峰，2周后恢復正常。
網織紅細胞減少：見于再生障礙性貧血，溶血性貧血再生危象時，典型再生障礙性貧血，網織紅細胞計數常低于0.005.網織紅細胞絕對值低于15×109/L為再生障礙性貧血的診斷標準之一。
網織紅細胞是尚未完全成熟的紅細胞，在周圍血液中的數值可反映骨髓紅細胞的生成功能，因而對血液病的診斷和治療反應的觀察均有其重要意義。
網織紅細胞是紅細胞的前身。骨髓中紅細胞系統的增生發育過程是：多 網織紅細胞
能干細胞→單能干細胞→原始紅細胞→早幼紅細胞→中幼紅細胞→晚幼紅細胞→網織紅細胞→成熟紅細胞。從原始紅細胞增殖到晚幼紅細胞階段共分裂3－4次，約需72小時，紅細胞數由一個變為8一16個，細胞核由大變小而濃縮，胞漿中含血紅蛋白逐漸增多。晚幼紅細胞以后細胞即不再分裂，發育過程中核被排出而成為網織紅細胞。網織紅細胞含有少量核糖核酸RNA)，用煌焦油藍染色時成網狀故名網織紅細胞。網織紅細胞進一步成熟，RNA消失而為成熟紅細胞。從晚幼紅細胞發育到成熟紅細胞約需48小時，成熟紅細胞的壽命約為120天。在正常情況下骨髓中有核紅細胞并不釋放至血循環，只有網織紅細胞和成熟紅細胞才釋入血中。因此，檢查末梢血中網織紅細胞數，可以推知骨髓生紅細胞的情況。網織紅細胞（以下簡Retc）是反映骨髓紅系造血功能以及判斷貧血和相關疾病療效的重要指標。過去，計數Retc十分麻煩費時也不易數準，ADVIA120儀器最大的優點之一是隨時可計數Retc,十分便利，而且計數的細胞多，故很準確。該儀器對Retc可提供6個參數，包括網織紅細胞總數（Retic#）、網織紅細胞百分比（Retic%）、網織紅細胞平均體積（MCVr）、單個網織紅細胞平均血紅蛋白濃度（CHCMr）、網織紅細胞分布寬度（RDWr）、單個網織紅細胞血紅蛋白含量（CHr）等，其中意義最大的，除了總數，百分比以外，最重要的網織紅細胞血紅蛋白含量（CHr）參數。現講述于下：Retc是剛脫去核尚殘留有少量RNA的未完全成熟的紅細胞。正常人外周血中甚少，如增加，表示紅系統增生（如急性溶血，多數溶血性貧血和其他增生性貧血），如貧血仍不見增生，可能是重型再障。抗貧血治療后明顯上升，表示治療有效，反之效果欠佳。故網紅的總數或百分比對貧血的臨床診斷及療效觀察非常有價值。是血液最常做的項目之一。
編輯本段網織紅細胞計數
(一)原理 網織紅細胞是晚幼紅細胞脫核后但尚未完全成熟的紅細胞,胞質中尚有核糖體、核糖核酸等嗜堿性物質殘存,經煌焦油藍或新亞甲藍活體染包后,胞質中可見藍或藍綠色枝點狀甚至網織狀結構。 (二)方法 活體染色法.近年來還可通過某些血液自動分析儀及流式細胞術檢測法進行網織紅細胞計數。 (三)參考值(活體染色法) 成人 0.5%--1.5% 新生兒 3%-6% 網織紅細胞絕對值(24-84)×109/L (四)臨床意義
編輯本段網織紅細胞增高
(1)提示骨髓造血功能旺盛 見于各種增生性貧血如缺鐵性貧血、巨幼細胞性(缺乏葉酸、維生素B12)貧血、失血性貧血,尤以溶血性貧血時增加最為顯著,常>10%。 (2)缺鐵性貧血及巨幼細胞性貧血在給予鐵劑、維生素B12、葉酸治療之后,可見網織紅細胞明顯增加。
編輯本段網織紅細胞減低
提示骨髓造血功能低下,見于再生障礙性貧血。
確定CELLDYN3700血細胞分析儀檢測網織紅細胞三項參數正常值范圍
方法:用CELLDYN3700血細胞分析儀,對102名正常成年人(男、女各半)作網織紅百分比(RET%)、網織紅細胞絕對數(RET#)和未完全成熟網織紅細胞分數(IRF)三項參數正常值范圍調查,并將所得數據進行統計學分析
結果:RET%:男性(21～39周歲)1
80±0
35,女性(20～39周歲)1
76±0
31,兩組差異無顯著性(P>0
05),合并后102名RET%為1
78±0
37(1
12～2
44);RET#(×109/L):男性91
4±28
3(34
8～148
0),女性72
3±25
6(21
1～123
5),兩組差異有顯著性(P<0
01);IRF:男性0
14±0
06(0
02～0
26),女性0
13±0
05(0
03～0
23),兩組差異無顯著性(P>0
05),合并后102名IRF為0
14±0
05(0
04～0
24)
常規采用玻片法，由于玻片法容易使混合血液中的水分蒸發，染色時間偏短，因此結果偏低。試管法容易掌握，重復性較好，被列為手工法網織紅細胞計數的參考方法。近年來，國內使用米勒窺盤進行計數，規范了計算區域，減少了實驗誤差，使結果準確性有所提高。
目前，國外逐步使用網織紅細胞儀器法測定，可自動染色、自動分析，自動打印出各階段網織紅細胞的分布圖，結果準確。
最新血細胞分析儀的應用，為網織紅細胞計數提供了更先進的測試手段，這類儀器采用熒光染色和激光測量的原理，不但能客觀地測量大量網織紅細胞，而且還能根據熒光強度，將其分為高熒光強度、中熒光強度和低熒光強度三類，這種分類法對估計化療后骨髓造血功能的恢復及骨髓移植效果有較重要的意義。
網織紅細胞 Miller;窺盤法;儀器法
Key words:Reticulocyte;Miller ocular;Analyzer
網織紅細胞是骨髓最新被釋放到外周血的成熟紅細胞的前提紅細胞，同成熟紅細胞相比，其細胞內仍殘存小量的RNA（嗜堿性物質），是反映骨髓造血功能的早期指標。目前測定網織紅細胞的自動分析儀主要有：多參數流式細胞儀（FCM），某些全自動血液分析儀，如：Sysmex-R系列分析儀，Miles H3型血液分析儀，Coulter Maxm型分析儀，Abbott CD3500血液分析儀[1,2]。國內多采用顯微鏡目測法。現將Sysmex-R3500分析儀，COULTER MAXM分析儀與Miller窺盤法的測定結果進行探討。
1 材料與方法
1.1 材料
(1)SYSMEX-R3500分析儀：日本希森美康株式會社生產。原裝試劑盒和質控物，批號分別是ZA9004，11130091。(2)COULTER MAXM 分析儀：美國COULTER 公司生產。原裝試劑盒和質控物，批號分別是109155，105379K。試劑盒由試劑A與試劑B組成，其主要成分分別是0.06%新亞甲藍與0.08%硫酸。(3)Miller窺盤法的試劑盒：由TONYAR DIAGNOSTICS.INC生產的ASK BCB Solution，批號A10。成分為焦油藍4 g/L與氯化鈉9 g/L。
1.2 方法
(1)SYSMEX-R3500分析儀測定原理：熒光染料堿性槐黃（或者全胺O）（Auramine O,AO）與網織紅細胞內RNA結合，以氬激光束為光源進行測定。操作步驟：混勻血液，直接測定網織紅細胞。(2)COULTER MAXM 分析儀測定原理：血液標本與新亞甲藍孵育活體染色，加入酸性試劑，使紅細胞內的血紅蛋白溢出，保存被染色的RNA于細胞內，細胞通過測定體積，高頻傳導性以及激光散射（VCS）而進行分析，測定出網織紅細胞。操作步驟：向A管加入4滴與50 μl血液標本，混勻，室溫16℃～30℃放置5 min～60 min.取A管液體2 μl于B管，加入試劑B液2 ml，等30 s，手動進樣檢測。(3)Miller窺盤法原理：煌焦油藍活體染色法。操作步驟：見全國臨床檢驗操作規程。為了重復性好，CV值較低，本次實驗采取了計數500個紅細胞內的網織紅細胞百分數。(4)測定SYSMEX-R3500，COULTER MAXM的批內，批間精密度，并與Miller窺盤法進行比較。分別用SYSMEX-R350